干细胞领域的全面质量管理方法研究

　　摘要：干细胞技术的发展为人类疾病的治疗提供了新的治疗思路，但与传统化学药品不同，干细胞的生产过程是一个动态且不易受控制的过程，这一特性赋予了干细胞领域质量极易发生变化的属性。为保证细胞产品质量，避免医疗事故，在细胞生产过程中引入全面质量管理有着十分重要的现实意义。

　　干细胞技术的发展为人类疾病的治疗提供了新的治疗思路，干细胞在生命科学、新药试验和疾病研究这3大生物医药领域发挥着重要作用。干细胞产业是典型的新型技术与新兴产业深度融合的产业，传统化学药品的生产过程主要包括原材料合成、中间体合成、成品制备；干细胞的生产过程是细胞生产，是一个动态且不易受控制的过程，这一特性也赋予了干细胞领域质量极易发生变化的属性。因此，最适合干细胞生产的质量管理理论就是全面质量管理方法。

　　全面质量管理是指通过市场调研、产品设计、研发生产和市场服务等手段，使企业内部各个组织或个人在项目管理流程中得到管理和控制，实现质量保证和质量产出的一系列活动，并通过实践活动将这些活动组合成一个质量体系的过程。全面质量管理是对细胞生产过程进行标准化管理，质量控制是全面质量管理的重要环节，全面质量管理的核心是“全面”，也就是指全过程质量管理、全员质量管理和全方法质量管理这3方面的内容来实现的；五大要素指的是“人机料法环”。

　　1.配置合适的技术人员

　　实验室设置生物安全委员会，由生物安全会对整个生产过程实施安全监督。实验室工作人员必须身体健康，每年定期体检，不允许有传染病（包括隐性传染病）、精神病、皮肤病，体表有伤口及对制品质量有潜在不利影响者从事直接接触细胞制备工作。实验室从事细胞制备的操作人员应具有相关专业（生物、免疫、检验和医学）大专及以上学历，有不少于50例干细胞制备经验，不少于1年细胞制备室工作经验，经国家、军队认可的相关机构干细胞治疗技术系统培训并考核合格。所有技术人员必须定期培训和学习，不断巩固自己的专业知识和专业技能，技术管理人员应定期参加区域性或全国性的有关干细胞技术的学术交流活动，紧跟行业步伐，实施更新质量管理文件。同时，干细胞领域属于高科技、高风险和高社会责任感的行业之一，技术人员又企业的核心竞争力，必须做好人力资源管理，积极发挥主要技术人员的主观能动性，为生产合格的细胞产品打好基础。

　　2.配置必要的环境条件和仪器设备

　　“工欲善其事，必先利其器”，要想做出合格的细胞产品，实验室必须提供细胞生产所需的环境条件、仪器和设备。

　　2.1实验室环境控制

　　为了保证细胞产品的安全，就必须从全局上考虑质量保障。实验室的设计必须由专门的设计院根据公司的生产流程进行，整个实验室建设过程中必须有专业的人员监督，使用标准必须达到GMP要求的万级或以上。

　　2.2实验室仪器设备

　　细胞实验室必须有配套的生物安全柜、低温冷冻离心机、倒置显微镜、流式细胞仪、CO2培养箱、普通恒温培养箱、高压灭菌锅、水浴锅、电子天平、以及分子生物学和免疫学相关的设备和仪器。

　　2.3实验室环境的监控

　　实验室环境对细胞质量有着至关重要的作用，所有的细胞制备、存储都必须在温湿度、风速、尘埃粒子、浮游菌和沉降菌都达标的环境中完成，同时需要定期对这些指标进行监测和记录，如果指标超出使用范围，应该及时地进行调整。

　　2.4实验室仪器设备的监控

　　仪器设备必须做好出入库管理，每一台设备都有专人进行管理，参与仪器设备的安装和调试，负责仪器设备验收，建立技术档案，负责该仪器的操作、维护、运行状态、保管和报修管理，制定仪器使用登记本，监督仪器使用登记以协助普通使用者解决使用中的问题等。所有的仪器设备都必须进行定期保养和维护，每年由第三方检测机构进行一次校准验证。

　　3.物料的科学管理

　　物料是一切生产的基础，从物料的采购、质量评估到物料调配的整个过程，都必须做好管理。

　　3.1物料的采购与存储

　　（1）物料管理要做到帐、卡、物相符，每月盘存和整理。

　　（2）物料盘存除了清点数量以外，还必须检查质量状况，每一批、每一样物料必须核对其出厂时间、批次及合格证，并定期抽查；物料盘存必须由2人同时执行，1人负责清点，1人负责复核。

　　（3）物料应按其属性分类分库码放，所有仓库物料储存于货架、托板上，整批物料应上垛，货垛要堆得牢固、整齐，物料不得倒置，托板应保持清洁，底部要能通风，物料入库前应拆除外包装或对外包装进行清洁。

　　3.2试剂的配置

　　试剂的配置必须由2名技术人员同时完成，每一种试剂使用前都必须查明试剂的名称、批号、有效期、试剂浓度，配置完成后要如实填写试剂配置记录，除了上述信息外，还应记录配置日期和配置者姓名。所有新配置的试剂在使用前都必须进行检测，检测合格并出具检测报告后方可使用。

　　3.3制定合适的物料管理标准操作程序

　　实验室有关物料的管理都应配有标准操作程序，编辑成册，定期对技术人员进行培训，物料标准操作程序由公司技术总监批准、签字和标明日期，任何改变都必须经过公司技术总监批准。

　　4.样本的要求

　　4.1避免传染病的影响

　　所有来自于人体的样本在进入实验室前必须进行传染病检测，包括乙肝五项、丙肝、艾滋、梅毒、巨细胞病毒等，坚决禁止病毒检测不合格的样本进入实验室，避免污染其他产品。

　　4.2样本的制备要及时

　　为了保证产品质量，样本采集后24h内必须送往实验室完成干细胞的分离制备，时间过长会严重影响细胞活率和收获量；在送往实验室的过程中，要做好密封，避免污染，且在运输途中要保持合适的温度。

　　4.3样本登记

　　每个样本在接收时都必须做好登记，包括编号、传染病信息、样本采集时间、供体姓名、年龄、供体知情同意书等，交接双方都需要签字确认，所有供体信息均应严格执行国家有关隐私权的规定。

　　5.样本的质量控制

　　5.1技术人员核对

　　技术人员首先对标本信息进行核对，然后对标本进行消毒后传入无菌实验室制备。单份样本制备的细胞需至少放置在2个CO2培养箱中培养，以免其中一台CO2培养箱出现故障影响细胞质量。

　　5.2细胞培养所需试剂和耗材

　　细胞培养所用试剂和耗材都必须经过检验合格的试剂，所有试剂和耗材的编号都必须清晰地体现到细胞制备记录上。

　　5.3细胞质量检测

　　细胞制备完成后，必须进行微生物、病毒、活力、表面标记物等检测，检测合格后方可入库，所有检测中用到的试剂和耗材、检测结果都必须清晰地体现到细胞质控记录上，质控记录不得随意涂改。

　　5.4质控文件管理

　　细胞的生产环节复杂，每一个阶段都各有特点，要想保证每一批次细胞的质量稳定性，就需要针对每一个工艺流程制定好规章制度，认真填写每一份工艺流程登记表，并签上名字和日期归档保管，做到所有产品有追溯性。

　　6.环境的要求

　　实验室的环境包括技术人员的工作环境、设备所处的环境、检测人员的工作环境等，每一个环节都要引起重视，细胞产品出现污染的原因中，环境占有很大的比重。

　　6.1实验室出入要求

　　（1）实验室严格执行人、物、污染物分流通道，通道不能混用。

　　（2）技术员严格按照细胞制备室人员进出标准操作规程进出洁净区，做好防护。

　　（3）外来人员未经允许，不准进入实验室洁净区。

　　（4）实验室内部禁止饮食、抽烟、嬉戏、打闹。

　　（5）所有实验室物品必须经过消毒后方可进入实验室。

　　6.2实验室环境要求

　　（1）实验室执行每天局部清洁，实验完毕后清洁生物安全柜、实验操作台以及移液器等。

　　（2）每周更换消毒剂种类，执行彻底清洁，包括所有仪器、设备、墙面、房顶、地面等。

　　（3）每月检测实验室环境是否达标，包括尘埃粒子数、浮游菌、沉降菌等。

　　7.结语

　　全面质量管理体系贯穿干细胞实验整个过程，包括GMP实验室建设、样本采集、干细胞提取、干细胞存储、干细胞检测、技术人员管理以及相关文件管理，对整个实验室标准化、规范化管理，保证干细胞产品的质量发挥着重要的作用。所有工作人员都必须严格执行各项质量管理制度，增强质量意识，认真执行公司及部门规章制度和操作规范，全面做好各环节的质量管理，如此才能提供安全有效的干细胞产品，防止医疗事故。

　　（作者单位：河南理工大学）