常用检验方法知多少

　　摘要：随着人们生活水平的提高，每年都会进行健康检查，检查时有很多的检测项目，通过看化验单，同一个指标可能有很多种检测方法，不同检测方法有什么特点，本文就来了解下常用检验方法。

　　随着社会的发展，人们对于健康的要求变高，随着医疗水平的提高，人们对于检验的需求不断变高，人们追求高水平的生活方式，比如每年都进行体检，甚至有人进行基因组检测，提早预防疾病的发生。在体检报告单上常会看到生化方法，免疫层析，化学发光，胶乳比浊，酶联免疫，流失荧光，核酸检测等，这些方法都是一些检验上经常使用的方法，下面我们一起来了解下这些方法。

　　1、生化检测法

　　生化检测也叫临床化学，是在研究人体健康和疾病的生物化学过程变化的基础上，利用物理学、化学、生物学、病理学、免疫学、生物化学的理论与技术，通过检测人体血液、尿液、脑脊液等样本中化学物质的量与质的变化，为临床医生或研究者提供疾病诊断、病情监测、疗效观察、判断预后以及健康评价等信息，最终判断被检者是否存在潜在疾病或排除某些疾病、揭示疾病变化以及药物治疗对机体生物化学过程影响的一种检测方法[1]。生化检测可以检测的样本类型有：体液：血清(浆)、尿液、唾液等；组织：动植物组织；食品：果汁、蜂蜜、牛奶、红酒、巧克力等；其它：保健品、化妆品。在人体中应用可以检测的项目有：肝功能（总蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比，总胆红素、直接、间接胆红素，转氨酶）；血脂（总胆固醇，甘油三酯，高、低密度脂蛋白，载脂蛋白）；空腹血糖；肾功能（肌酐、尿素氮）；尿酸；乳酸脱氢酶；肌酸肌酶等。使用生化分析仪进行检测，检测前要对仪器进行校准，完成实验室的室间质评，保证检测结果的准确性。

　　2、免疫层析法

　　免疫层析技术是应用免疫和色谱层析技术用来快速检测分析血清蛋白的一种方法[2]，此方法最开始是在上个世纪60 年代的发达国家出现，这种方法是层析时由标记物与待检测的物质络合而成的结合物被相应的配体捕获在硝酸纤维素膜上不断富集浓缩形成检测线（Test 线），通过纤维膜上是否显色，条带颜色的深浅及反射光线来进行定量和定性的判定。免洗层析的产品通常是由样品垫，结合垫，硝酸纤维素（NC）膜，检测线（T 线），质控线（C 线），吸水垫、聚氯乙烯（PVC）底板等构成，其标志物有很多种，常见的有胶体金，量子点，磁性纳米材料，胶体碳，稀土纳米材料等有颜色的标志物，依据被检测物质的大小及抗体和抗原的结合方式，抗原分为双抗夹心法以及竞争法。该技术被广泛应用在快速检验中，其特点是检测快速，操作便捷，灵敏度高，在食品检疫和环境检测，床旁检测应用较多。

　　3、化学发光法

　　化学发光免疫测定（CLIA）是将抗原与抗体特异性反应与敏感性的化学发光反应相结合而建立的一种免疫检测技术。化学发光是指伴随化学反应过程所产生的光的发射现象。其检测原理是以化学发光剂、催化发光酶或产物间接参与发光反应的物质等标记抗体或抗原，当标记抗体或标记抗原与相应抗原或抗体结合后，发光底物受发光剂、催化酶或参与产物作用，发生氧化还原反应，反应中释放可见光或者该反应激发荧光物质发光，最后用发光光度计进行检测。依据发光原理可以分为，直接化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析和电化学发光免疫分析法。化学发光法的优点是特异性高、敏感性高、分离简便、快速、试剂无毒、安全稳定、可自动化，搭配大型发光检测设备使用。化学发光法在检验科，中心实验室，第三方实验室中使用较多，这种方法对于设备的要求较高，可以实现自动化检测。

　　4、酶联免疫法

　　酶联免疫检测(ELISA)是常见的抗体或抗原测定方法[4]。ELISA 是基于相关联的酶对那些免疫复合物发生酶催化反应进行测定的。抗体可以固定在一个有表面涂层的塑料板上，因此经简单洗涤这块塑料板，免疫复合物就易于与其他组分分开，而进行测定。ELISA 有四种主要类型：直接法、间接法、竞争法和双抗夹心法。由于其具有特异、灵敏、简便、快速的特点，现已在生物医学研究领域及临床疾病的诊疗中得到了广泛的应用，但其灵敏度和重复性不及发光法，易造成漏检和假阳性，再加上酶的纯度和反应过程容易受环境因素影响而导致结果稳定性不好。该方法常用于检测乙肝病毒标志物，HIV 抗体检测。

　　5、分子诊断

　　分子诊断主要是应用分子生物学方法检测生物体内遗传物质的结构或表达水平的变化而做出诊断的技术[5]。由于分子诊断可以从基因层次进行检测，因此检测灵敏度和准确性的优势较为明显，可在感染初期识别病毒或者提早确认基因缺陷，从而提供个性化的医疗诊断服务，主要应用于遗传病、传染性疾病、肿瘤等疾病的检测与诊断。分子诊断主要包括核酸诊断和生物芯片技术。分子诊断主要应用的技术有聚合酶链式反应PCR，荧光原位杂交FISH，基因芯片，基因测序等，分子诊断具有检测时间短、灵敏度更高、特异性更强等优势，被广泛应用于传染性疾病、血液筛查、遗传性疾病和伴随诊断等领域。目前新冠病毒的核酸检测就是用的这个方法。

　　参考文献

　　[1] 贺智英．临床生物化学检验的概念及常用技术[J/CD]．临床医药文献电子杂志，2015,10(8):1553,1556.

　　[2] Chute Cg ,Ullman-Cullere M , Wood Gm,et al. Some experiences and opportunities for big data in translational restarch[J]. Genet Med,2013,15(10):802-809.

　　[3] Pasechnikov V，Chukov S，Fedorov E， et al． Gastric cancer: Prevention，screening and early diagnosis ［J］． World J Gastroenterol， 2014，20( 38) : 13842-13862．

　　[4] 李阳，王云龙．免疫层析技术的研究进展[J]．中国卫生检验杂志，2015,25(22):3978-3980.

　　[5] Markets and Markets. Molecular diagnostics market by application ［（ infectious disease （ HIV ， HBV ， TB ）， Oncology ， Genetics ， Microbiology）］，technology（PCR，hybridization，DNA sequencing），end user（hospitals，laboratory），product & service（reagent，software）—forecast to 2021[EB/OL]. （2017-02） [2018-02-03].