浅谈婴幼儿ABO血型鉴定的质量控制方法

  • 来源:保健文汇
  • 关键字:婴幼儿,血型鉴定,质量控制
  • 发布时间:2014-12-09 14:09

  摘要:目的:总结探讨婴幼儿血型鉴定的影响因素并对常见的几种影响因素加以分析和总结。方法:对本院2012年7月至2013年12月共560例婴幼儿分别采用玻片法和试管法进行血型鉴定。结果:玻片法和试管法存在一定结果不符,其准确率低于试管法。结论:血型鉴定存在一定的影响因素,血型鉴定时,需要综合考虑。

  关键词:ABO 血型;血型鉴定;婴幼儿

  [中图分类号] R2 [文献标识号] A [文章编号] 1061-6035(2014)11-0010-01

  血型鉴定是每个婴幼儿都需要做的常规检验项目之一,检验后会将结果记入幼儿鉴定档案。目前临床实验室最常用的ABO血型的鉴定方法是血凝实验和微柱凝胶试验(MGT)。微柱凝胶法虽然方法较先进,操作简单,所需样本量少,程序自动化,结果明确可靠,但成本价高,价格昂贵,笔者所在基层卫生院并不具备此种鉴定条件。血凝试验是指抗体和红细胞在液体介质中发生肉眼可见的凝集反应,根据操作方法的不同,主要分为玻片法和试管法。这两种血型鉴定方法操作简便、节省材料、价廉,目前广泛应用于临床,但鉴定结果在实际操作中会受到诸多因素的影响。本文通过对560名婴幼儿的玻片法和试管法的血型鉴定结果进行统计分析,探讨婴幼儿ABO血型鉴定中的影响因素。

  1 资料和方法

  标本来源:2012年7月至2013年12月期间本院门诊采集560名婴幼儿检查血型样本,婴幼儿年龄6个月~3岁,平均年龄2岁。每名婴幼儿同时用玻片法和试管法两种方法进行ABO血型鉴定。

  血型试剂:①抗A血型试剂、抗B血型试剂,由上海华泰生物工程实业有限公司提供,特异性及亲和力均符合国家标准,保存在2~8℃冰箱,有效期内使用。

  ②ABO标准红细胞系3份以上同型成人红细胞洗涤3次混合,配制成2%-5%的标准红细胞悬液,当天配剂。

  标本采集:抽取EDTA抗凝血,在2小时内完成ABO血型鉴定操作。

  正定型法:①玻片法:取清洁且带有圆形凹陷的推片1张,并注明A、B:字样。将抗A试剂、抗B试剂各1滴分别滴于玻片上A、B处。分别取等体积待检血样(5%红细胞悬液或全血)于抗A试剂和抗B试剂。另取洁净推片1张,标明A细胞、B细胞和0细胞,用滴管各加受检者血清1滴,再分别用滴管滴加A、B和0型试剂红细胞悬液1滴。用不同的竹签将分型试剂与待检血样调匀,同时不停的摇动玻片(或瓷盘)并观察血型凝集(或溶血)反应,也可用低倍镜观察结果。

  ②试管法:取洁净小试管(内径10mm×60mm)2支,分别标上抗A、B字样,分别加入抗A、抗B标准血清各1滴,于相应标记的试管;然后分别加入被检者2%红细胞生理盐水悬液l滴于各试管充分混匀;以1000转/分的速度离心1分钟判定结果。将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(或溶血)现象。如肉眼不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜检查。

  ③反定型法:首先将待检血离心(2500r/mm,3min)分离血清;取小试管3支,分别标记A、B、O,各管加被检者血清1滴,然后按标记分别加入5%的A、B、O型标准红细胞生理盐水1滴,混匀;以1000r/m比离l~,lmin后取出试管,轻摇管底,观察凝集。

  结果判断:凝集判断标准红细胞均匀分布,无凝集颗粒,显微镜下红细胞分散存在,无凝集靠拢现象为阴性,红细胞出现凝集为阳性。

  统计学方法:全部数据采用SPSS11.5统计软件包处理,计量资料以±s表示。计数资料用频数和率表示,计数资料比较用检验。P<9.05有差异,有统计学意义。

  2 结果

  ①婴儿ABO抗原弱,抗体产生早晚不一,血型难定者多为8个月(包括8个月)婴儿。

  ②玻片法和试管法的血型鉴定结果见附图:从图中可以看出不论是玻片法还是试管法,560名婴幼儿的血型分布是一致的,即O型最多,之后依次为B、A、AB,即O>B>A>AB。

  ③试管法的准确性比玻片法高,在血型鉴定不完全一致的因素中,冷凝集占50%,抗原效价弱占28.8%,类B抗原占7.1%,抗体效价弱占7.0%,细菌严重污染导致的占7.1%。

  3 讨论

  输血安全是临床输血的首要问题,目前所有婴幼儿都会进行血型鉴定,并将其结果记入幼儿鉴定档案,以确保今后婴幼儿在就诊时的输血安全。玻片凝集法鉴定血型操作简单,成本低,大多数医院,尤其是像笔者所在的基层卫生院多采用此法,但影响玻片凝集法的因素很多,单采用此法容易得出错误的血型鉴定结果,本文采用玻片凝集法正定型与试管凝集法反定型相结合,由初检人员与审核人员分别操作,互相核对的方法,可以发现由于人为因素或其他因素造成的血型鉴定错误。因此,在实践操作过程中应注意以下几个问题:

  (1)检验人员

  采集标本时,应严格按照相关医疗操作规程操作,防止标本采集错误。在编号时应做好婴幼儿标本与血型报告单的核对工作,血标本离心后,如发现有不合格样本应通知人员重新采样,做好检测前的质量控制工作。

  (2)被检红细胞

  ①血型测定的错误血型:检测时,因患者红细胞悬液浓度过低,又只用肉眼观察结果,使之在血型抗原较弱的情况下,微弱、细小的凝集未看到,而造成定型报告错误。

  ②标本新鲜,严防污染。细菌污染的标本,红细胞上T抗原被激活,与标准血清中的抗T抗体结合,出现全凝集现象,干扰血型鉴定。

  (3)实验器材

  ①所用器材必须清洁、干燥,试管、滴管要专用,标记清楚。

  ②用试管法定型时,应同时进行正向和反向定型。每批测定均须设置对照。

  ③红细胞浓度按要求配制,红细胞与相应抗体的比例适当。

  总之,在患者ABO血型鉴定试验中,如果出现正反定型结果不符,不能轻易发报告,否则,可致ABO血型的误判。因此,在具备认真的工作态度的基础上,还需要不断积累丰富的血型鉴定经验,对异常结果进行系统全面地分析,查明原因,以获得ABO血型的准确定型,确保安全输血。

  参考文献

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  [2]尚晓斌,黄昌杰等.对医学实习生进行内科临床实践能力培养的教学体会[J].广西医科大学学报,2008,25(10):235236.

  [3]张悦,袁丽杰.构建医学检验专业技能培训体系的规划与设计思路[q].现代生物医学进展,2006,6(9):127.

  李妮娜

  (滨海镇卫生院 317503)

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