如何做好酶免试验室内质量控制

　　摘要：定性ELISA试剂本身的阴性、阳性对照只能监测实验的有效性，无法监测灵敏性及测定下限的变化，为了更好的保证血液检测质量，必须使用弱阳性质控品进行外部评价，即室内质量控制。它的主要作用在于监测实验的精确性和重复性，发现随机误差，减少系统误差对实验的影响，那么检验科实验室如何做好酶免试验的室内质量控制就显得尤为重要。

　　关键词：ELISA；质控品；室内质量控制

　　[中图分类号] R2 [文献标识号] A [文章编号] 1061-6035（2014）14-0365-01

　　酶联免疫吸附试验（ELISA试验）是医学检验的免疫学检验方法之一，已经广泛应用到对病原微生物的免疫学检查试验中。定性ELISA试剂本身的阴性、阳性对照只能监测实验的有效性，无法监测灵敏性及测定下限的变化，为了更好的保证血液检测质量，必须使用弱阳性质控血清进行外部评价，即室内质量控制。它的主要作用在于监测实验的精确性和重复性，发现随机误差，减少系统误差对实验的影响，那么检验科实验室如何做好酶免试验的室内质量控制就显得尤为重要。本文就如何做好酶免试验室内质量控制进行了一些探索性分析，与同行探讨。

　　一、选择合适的质控品浓度

　　现在医疗机构使用的室内质控品基本上都是商品化的质控品。购买的质控品可以是定值，也可以是非定值。有定值的质控品对一个实验项目有一系列的浓度，那么我们就必须对这一系列浓度的质控品进行测定，以选择适合自身浓度的质控品。方法为：购买少量系列浓度的质控品，以目前正在使用的试剂、方法对其进行测定，求其OD均值，并计算出S/CO均值，以3倍左右的S/CO值作为选择质控品浓度的标准。

　　二、做好新进质控品使用前的验证工作

　　每次新到的质控品，由于邮寄过程中温度不能保证，质控品浓度会有所变化，尤其是高温季节，因此，质控品的使用前确认就显得尤为关键。方法为：用同一个批号的试剂对其测定，求出S/CO均值，与原来使用相同浓度（不同批号）的质控品测定的S/CO均值比较，自己制定一个可接受范围标准，在标准范围内则可使用，超出标准则不能使用。

　　三、正确保存和使用质控品

　　购买回质控品后，应严格按照要求及时将质控品保存在-20℃以下，做好标识，使用时应根据实验用量，有规律、有计划地对其融解，最好每周融解一次，保存在2-6℃冰箱内，避免反复冻融，也不要一次融解过多，长时间使用。另外，在实验过程中应当尽量减少质控品在室温的放置时间，每次加样完毕后及时存放冰箱。这样才能保证质控品内各成分相对稳定，保证监测实验结果的精确性。

　　四、做好质控品的重复性和精确性

　　目前，医疗机构检验科实验室最关心的是如何做好质控品的重复性和精确性。不同批号的试剂，不同批号的质控品，不同的人员操作，会对质控品的重复性产生一定的影响，但在实验过程中发现这个差异不大，完全可以接受。酶免实验项目分手工操作法和全自动酶免系统上机法，手工操作法本身影响因素多，现在很多有条件的实验室都使用全自动酶免系统做实验。其主要影响因素有：1.全自动酶免系统前处理加样的准确性、洗板机洗板的彻底性和酶标仪测量的准确性，我们应当定期对其维护、保养和校准，确保检测结果准确无误；2.酶免实验室环境温湿度要求：温度18-25℃，湿度30-70％，保证室内的温度和湿度符合实验要求；3.所有试剂在用于操作检测标本之前必须室温平衡30分钟以上，以保证反应时间的准确性和一致性；4.实验室人员要严格按照作业指导书操作，不能随意更改实验操作步骤。

　　五、做好室内质量控制的连续性

　　不同批号的试剂、质控品、不同的人员操作，都应重新绘制质控图，这样就很难保证质控图的连续性，尤其是一些小的实验室，试剂和质控品的批号频繁地更换，这样就更不能保证室内质量控制的连续性。另外，重新绘图时，会暂时出现一个质控图的断档现象，而且断档期的数据无法得到控制，形成一时的“盲区”。一个好的解决方法是：我们要加大同一厂家同一批号的试剂和质控品的库存量，一般为4-5个月；而在试剂或质控品更换时，只需在质控图上作标记，按原来的方法继续绘图，达到一定次数后（一般为20次），重新求出均值和标准差，按新的数据继续绘图，这样就不会出现断档，也能更好地做到质控图的连续性。

　　六、正确使用质控判断规则

　　现在我们酶免实验室大多采用Westgard多规则质控图法，通常有6个质控规则：12S、13S、22S、R4S、41S、10X。判断规则为：（1）12S规则仅作为警告规则，启动其他质控规则以助于数据的快速判断。（2）如果没有质控数据超过质控限，则判断分析批在控，可以报告检测结果。（3）如果一个质控测定值超过质控限，应由13S、22S、R4S、41S、10X规则来进一步检验质控数据。如果没有违背这些规则，则判断该批在控；如果违背其中任一规则，则判断为该批失控。

　　苏丽萍