药用植物浸制标本液的配置方法改良初探
- 来源:职业
- 关键字:药用植物学,中药,制药,药检
- 发布时间:2011-09-01 17:48
《药用植物学》课程是我校中药、制药、药检专业的必修课程，该课程分为植物器官形态、显微构造、植物分类学等三部分内容。其中，植物器官形态部分的教学需要学生对花、果实等器官进行解剖或观察等操作，而在实际教学中，因为受到季节、天气等因素的影响，每次都使用新鲜材料的方法是不现实的，需要教师事先准备好部分植物浸制标本。但如果在浸制时所使用的固定液和保存液不合适的话，将会影响标本的色泽及观察效果。为此，笔者对常用的几种浸制液进行了实践与改良，目前我校所使用的浸制液，对于保持植物标本的原色效果明显。在此进行比较说明。
一、简易浸制液配比方法及优缺点比较
70%乙醇5ml，蒸馏水100ml，按此比例混合使用，能使标本保存时间较长而不腐烂发霉，但标本易脱色。
5～10ml甲醛（福尔马林），蒸馏水100ml，它的特点是价格较低，能使标本保存时间较长，但保存液本身易变成褐色，标本亦易褪色。
95%乙醇100ml，甘油5～10ml，蒸馏水195ml，混合后使用，此保存液效果较好，但价格较贵，亦会使标本褪色。
以上方法配置的浸制液，其配比方法简单实用，原料来源方便，易操作，费用少，适合短期内保存标本。
但是，这些方法的共同缺点在于：浸制标本的原色容易丧失，影响标本在教学中的直观性，不适用需要长期保存及保持原色的标本。
二、常用浸制液简介
1.绿色标本的浸制液处理
在50ml水里加入50ml冰醋酸，配成100ml体积分数为50％的乙酸溶液，再逐渐放进6g硫酸铜碎块，不断搅拌，制成饱和的乙酸铜原液。然后，将此饱和溶液按照1份溶液4份水的比例进行稀释，随后加热。当加热到80℃的时候，把修剪清洁过的绿色标本投入到溶液中，并轻轻翻动。在加热过程中，绿色标本由绿转黄，再次变成绿色时即可停止加热。将标本在清水里洗涤干净后，移入5％的甲醛中固定2～3天，最后在标本瓶中用配比为40％的甲醛40ml+95％的乙醇10ml+亚硫酸饱和水液50ml+蒸馏水1000ml所制的混合液浸泡保存，或者直接用5％～10％的甲醛或0.01～0.04g/ml的亚硫酸溶液浸泡，长期保存。
禾本科植物或较易软烂的植物，可以直接浸到饱和醋酸铜（制法如上所述）100ml和乙酸10～16ml的混合液中，或者浸到硫酸铜、甲醛混合液中，浸泡10～20天后再更换一次混合液并浸泡10天至恢复原色，取出洗净，用5％的甲醛保存。
2.多色标本的浸制液处理
对于植株上有多种颜色的植物，先用质量分数为20％的氯化镁溶液浸泡1～4天，然后分别用质量分数为30％、50％、75％的氯化镁溶液依次浸泡，每次浸泡5～7天（pH为5.8），再分别用质量分数为85％、95％、100％的氯化镁溶液浸泡，每次浸泡7～10天。最后，在过饱和氯化镁固定液中保持原色。
优缺点分析：以上浸制液处理后的标本，存放时间较长，标本的原色亦能保持。但是，这些浸制液的配制较为复杂，费用较高，处理程序繁琐耗时，且所用的甲醛具挥发作用，对空气造成污染，且对人体有一定的毒害作用，不利于保管人员及参观人员的身体健康。
三、改良浸制液简介
为解决以上问题，笔者与实验老师经过探索，自2004年以来，配比了几种不同的浸制液，经过比较，择取了目前最为经济，操作简易的浸制液，用该浸制液制取的浸泡植物标本，从2004年至今，色泽、外观均与新鲜材料差异不大，现将本法简介如下：
1.实验试剂
冰醋酸、硫酸铜、水合氯醛、乙醇、纯净水等。
2.实验器材
标本瓶16个，浸泡用大缸4个，采集、鉴定工具若干。
3.植物材料
益母草（带红花）、禺毛茛（带黄花）、蓖麻（带紫红色果实）、老鼠拉冬瓜（带绿色、黑色果实）。其中益母草、禺毛茛为全株带白色根部，蓖麻折取带果枝条，老鼠拉冬瓜剪取中间部分藤枝。
4.实验步骤说明
先将以上植物材料进行清洁、剪枝处理，去除虫卵、泥巴以及多余的枝条，保持植株美观。然后分四组进行试验，分别采用不同的试剂制取浸制液对标本进行处理，在多种环境中比较标本的变色及腐败情况，最终完成实验，得出结论。
5.处理方法
分对比组、实验组1、实验组2、实验组3。每组均含以上四种植物标本，四种标本分别含有不同颜色的器官，可检验浸制液对多种色素的保色情况。
6.过程
（1）分别对四组植物材料进行保色处理。
对比组：以常规方法，用冰醋酸、硫酸铜、纯净水制取乙酸铜溶液，将植物材料置于该溶液中浸泡，当看到植物体绿色部分转黄褐色再转回绿色时，及时取出清洗干净后存于75％乙醇溶液中密封保存。
实验组1：将植物材料按常规方法进行保绿处理后，以0.2％水合氯醛溶液浸泡24h固定。然后清洗干净存于75％乙醇溶液中密封保存。
实验组2：直接将清洁好的植物材料置于3.5％水合氯醛溶液中浸泡24h固定。取出后以纯净水不断浸泡漂洗至水合氯醛全部被纯净水替换。然后以75％乙醇溶液密封保存。
实验组3：处理方法同实验组2，只是把水合氯醛的浓度调低为0.2％。
（2）实验组处理原理分析。水合氯醛试液为常用优良的化学透明剂之一，特点是能迅速透入组织，使干燥收缩的细胞逐渐膨胀复原，并能溶解大多数细胞内含物，如淀粉粒、叶绿体、菊糖、树脂、蛋白质、挥发油等，使细胞组织清晰透明，易于观察。笔者在用徒手切片法制做临时装片时发现，用水合氯醛固定叶的横切面装片，当浓度配比合适时，叶片横切面中的叶绿体不但没有被溶解，反而整个装片在一段时间内能保持其色泽不变。据此，笔者大胆推测，是否可以用水合氯醛直接对植物材料进行固定处理，去除其体内的淀粉粒、多糖、脂肪、蛋白质、树脂等易氧化、分解的物质，保留原有色素，达到保色的目的。本实验方法基于此原理进行。
（3）分阶段检查各组材料变色情况。本实验时间自2004年6月始，其间经一个月、三个月、一年、两年、五年几个阶段对各组材料进行检查。
四组浸泡标本分别产生了不同变化。对比组为传统浸制液处理，其绿色能长期保持，但是，该绿色与自然界植物比较，颜色有偏差，带蓝绿的色泽，其他颜色均在一段时期后褪色。实验组1为传统方法处理后，加0.2％水合氯醛固定。该法能使植物体的色泽长期保持，但同对比组一样，颜色与原植物比较有偏差。实验组2、3撇弃传统方法，直接以不同浓度水合氯醛溶液对植物标本进行固定。实验组2以3.5％水合氯醛溶液处理，本组标本褪色较严重，从水合氯醛能溶解脂肪等物质的原理分析，用较高浓度的水合氯醛处理标本，不仅使淀粉粒、多糖等溶解，亦破坏了叶黄素、胡萝卜素等脂溶性色素的结构，从而导致标本的褪色。实验组3以0.2％水合氯醛溶液对植物材料进行处理，结果显示，经本法处理的标本，在较长一段时期内能保持其原色鲜艳不变。考虑后期继续以不同浓度的水合氯醛溶液进行实验，以求找到最合适的配比方法。
四、结论
我校对药用植物浸制标本液的改良方法探索结果显示，本法所用的试剂水合氯醛对人体毒害性较小，临床上亦用作催眠药。水合氯醛须在加热的情况下才会产生挥发性的有毒气体，常温下挥发性非常小。当以合适浓度的水合氯醛对药用植物标本进行固定时，能使植物标本长期保持原色。经过固定的标本直接保存于75％浓度的乙醇溶液中。本法处理方式简单，试液制取简便易行，费用低廉。
长期用于教学和参观不会影响人员的身体健康。
但是，由于本实验所处理的植物标本数量、类型有限，未知本法对植物体内含有乳汁、树脂等植物的保色效果是否能达到预期目的，且目前所取水合氯醛浓度是否为最佳处理，这些都有待进一步实验论证。
（作者单位：广西药科学校，广西卫生职业技术学院）
文/赵颖刘中明
……
一、简易浸制液配比方法及优缺点比较
70%乙醇5ml，蒸馏水100ml，按此比例混合使用，能使标本保存时间较长而不腐烂发霉，但标本易脱色。
5～10ml甲醛（福尔马林），蒸馏水100ml，它的特点是价格较低，能使标本保存时间较长，但保存液本身易变成褐色，标本亦易褪色。
95%乙醇100ml，甘油5～10ml，蒸馏水195ml，混合后使用，此保存液效果较好，但价格较贵，亦会使标本褪色。
以上方法配置的浸制液，其配比方法简单实用，原料来源方便，易操作，费用少，适合短期内保存标本。
但是，这些方法的共同缺点在于：浸制标本的原色容易丧失，影响标本在教学中的直观性，不适用需要长期保存及保持原色的标本。
二、常用浸制液简介
1.绿色标本的浸制液处理
在50ml水里加入50ml冰醋酸，配成100ml体积分数为50％的乙酸溶液，再逐渐放进6g硫酸铜碎块，不断搅拌，制成饱和的乙酸铜原液。然后，将此饱和溶液按照1份溶液4份水的比例进行稀释，随后加热。当加热到80℃的时候，把修剪清洁过的绿色标本投入到溶液中，并轻轻翻动。在加热过程中，绿色标本由绿转黄，再次变成绿色时即可停止加热。将标本在清水里洗涤干净后，移入5％的甲醛中固定2～3天，最后在标本瓶中用配比为40％的甲醛40ml+95％的乙醇10ml+亚硫酸饱和水液50ml+蒸馏水1000ml所制的混合液浸泡保存，或者直接用5％～10％的甲醛或0.01～0.04g/ml的亚硫酸溶液浸泡，长期保存。
禾本科植物或较易软烂的植物，可以直接浸到饱和醋酸铜（制法如上所述）100ml和乙酸10～16ml的混合液中，或者浸到硫酸铜、甲醛混合液中，浸泡10～20天后再更换一次混合液并浸泡10天至恢复原色，取出洗净，用5％的甲醛保存。
2.多色标本的浸制液处理
对于植株上有多种颜色的植物，先用质量分数为20％的氯化镁溶液浸泡1～4天，然后分别用质量分数为30％、50％、75％的氯化镁溶液依次浸泡，每次浸泡5～7天（pH为5.8），再分别用质量分数为85％、95％、100％的氯化镁溶液浸泡，每次浸泡7～10天。最后，在过饱和氯化镁固定液中保持原色。
优缺点分析：以上浸制液处理后的标本，存放时间较长，标本的原色亦能保持。但是，这些浸制液的配制较为复杂，费用较高，处理程序繁琐耗时，且所用的甲醛具挥发作用，对空气造成污染，且对人体有一定的毒害作用，不利于保管人员及参观人员的身体健康。
三、改良浸制液简介
为解决以上问题，笔者与实验老师经过探索，自2004年以来，配比了几种不同的浸制液，经过比较，择取了目前最为经济，操作简易的浸制液，用该浸制液制取的浸泡植物标本，从2004年至今，色泽、外观均与新鲜材料差异不大，现将本法简介如下：
1.实验试剂
冰醋酸、硫酸铜、水合氯醛、乙醇、纯净水等。
2.实验器材
标本瓶16个，浸泡用大缸4个，采集、鉴定工具若干。
3.植物材料
益母草（带红花）、禺毛茛（带黄花）、蓖麻（带紫红色果实）、老鼠拉冬瓜（带绿色、黑色果实）。其中益母草、禺毛茛为全株带白色根部，蓖麻折取带果枝条，老鼠拉冬瓜剪取中间部分藤枝。
4.实验步骤说明
先将以上植物材料进行清洁、剪枝处理，去除虫卵、泥巴以及多余的枝条，保持植株美观。然后分四组进行试验，分别采用不同的试剂制取浸制液对标本进行处理，在多种环境中比较标本的变色及腐败情况，最终完成实验，得出结论。
5.处理方法
分对比组、实验组1、实验组2、实验组3。每组均含以上四种植物标本，四种标本分别含有不同颜色的器官，可检验浸制液对多种色素的保色情况。
6.过程
（1）分别对四组植物材料进行保色处理。
对比组：以常规方法，用冰醋酸、硫酸铜、纯净水制取乙酸铜溶液，将植物材料置于该溶液中浸泡，当看到植物体绿色部分转黄褐色再转回绿色时，及时取出清洗干净后存于75％乙醇溶液中密封保存。
实验组1：将植物材料按常规方法进行保绿处理后，以0.2％水合氯醛溶液浸泡24h固定。然后清洗干净存于75％乙醇溶液中密封保存。
实验组2：直接将清洁好的植物材料置于3.5％水合氯醛溶液中浸泡24h固定。取出后以纯净水不断浸泡漂洗至水合氯醛全部被纯净水替换。然后以75％乙醇溶液密封保存。
实验组3：处理方法同实验组2，只是把水合氯醛的浓度调低为0.2％。
（2）实验组处理原理分析。水合氯醛试液为常用优良的化学透明剂之一，特点是能迅速透入组织，使干燥收缩的细胞逐渐膨胀复原，并能溶解大多数细胞内含物，如淀粉粒、叶绿体、菊糖、树脂、蛋白质、挥发油等，使细胞组织清晰透明，易于观察。笔者在用徒手切片法制做临时装片时发现，用水合氯醛固定叶的横切面装片，当浓度配比合适时，叶片横切面中的叶绿体不但没有被溶解，反而整个装片在一段时间内能保持其色泽不变。据此，笔者大胆推测，是否可以用水合氯醛直接对植物材料进行固定处理，去除其体内的淀粉粒、多糖、脂肪、蛋白质、树脂等易氧化、分解的物质，保留原有色素，达到保色的目的。本实验方法基于此原理进行。
（3）分阶段检查各组材料变色情况。本实验时间自2004年6月始，其间经一个月、三个月、一年、两年、五年几个阶段对各组材料进行检查。
四组浸泡标本分别产生了不同变化。对比组为传统浸制液处理，其绿色能长期保持，但是，该绿色与自然界植物比较，颜色有偏差，带蓝绿的色泽，其他颜色均在一段时期后褪色。实验组1为传统方法处理后，加0.2％水合氯醛固定。该法能使植物体的色泽长期保持，但同对比组一样，颜色与原植物比较有偏差。实验组2、3撇弃传统方法，直接以不同浓度水合氯醛溶液对植物标本进行固定。实验组2以3.5％水合氯醛溶液处理，本组标本褪色较严重，从水合氯醛能溶解脂肪等物质的原理分析，用较高浓度的水合氯醛处理标本，不仅使淀粉粒、多糖等溶解，亦破坏了叶黄素、胡萝卜素等脂溶性色素的结构，从而导致标本的褪色。实验组3以0.2％水合氯醛溶液对植物材料进行处理，结果显示，经本法处理的标本，在较长一段时期内能保持其原色鲜艳不变。考虑后期继续以不同浓度的水合氯醛溶液进行实验，以求找到最合适的配比方法。
四、结论
我校对药用植物浸制标本液的改良方法探索结果显示，本法所用的试剂水合氯醛对人体毒害性较小，临床上亦用作催眠药。水合氯醛须在加热的情况下才会产生挥发性的有毒气体，常温下挥发性非常小。当以合适浓度的水合氯醛对药用植物标本进行固定时，能使植物标本长期保持原色。经过固定的标本直接保存于75％浓度的乙醇溶液中。本法处理方式简单，试液制取简便易行，费用低廉。
长期用于教学和参观不会影响人员的身体健康。
但是，由于本实验所处理的植物标本数量、类型有限，未知本法对植物体内含有乳汁、树脂等植物的保色效果是否能达到预期目的，且目前所取水合氯醛浓度是否为最佳处理，这些都有待进一步实验论证。
（作者单位：广西药科学校，广西卫生职业技术学院）
文/赵颖刘中明
关注读览天下微信，
100万篇深度好文，
等你来看……
